1、猪血铜锌超氧化物歧化酶分离纯化
探讨了从猪血中分离纯化SOD的方法并对其稳定性进行了研究。现将结果报告如下:1.分离纯化研究 以新鲜猪血为材料,在低温条件下,高速离心除去血浆后,用0.9%的NaCl溶液洗涤红血球。将干净的红血球中加入0.6%的Triton
X-100低温下冻融处理2小时,得到溶血液;用有机溶剂(乙醇-氯仿)处理溶血液,...........50页
2、牛血铜锌超氧化物歧化酶规模化生产
SOD纯化制备有经典法、离子交换法、疏水色谱法、凝胶过滤法和金属鳌合亲和层析法等。但大多以实验室制备为主，生产成本高、不宜工业化规模生产。本文以牛红细胞为原料，在前人工作的基础上，建立了红细胞连续分离技术，并证明冷冻红细胞和新鲜红细胞制备的SOD在收率、纯度、比活等方面无明显差别;通过铜锌盐存在下的热变性去除血红蛋白，可省去传统工艺中所用的大量氯仿和乙醇;利用超滤技术浓缩提取液可大幅度减少丙酮用量;通过离子交换法进一步纯化了SOD;从而确立了新的SOD工业化生产制备方法，实现低成本、高效益、高纯度的.........30页（包含投资分析报告）
3、大蒜细胞溶质中超氧化物歧化酶分离纯化
大蒜含有丰富的超氧化物歧化酶(Superoxide Dismutase ,SOD )，超氧化物歧化酶具有清除超氧自由基(02一功能，有效地预防O2.·对机体的毒害作用。本研究采用热变性、聚乙二醇6000
( PEG)沉淀作用、DEAE一纤维素柱层析三种方法对大蒜细胞溶质中的超氧化物歧化酶进行了分离纯化;利用改良的连苯三酚自氧化法测定了酶活力.............35页
4、猪血铜锌超氧化物歧化酶的纯化
采用有机溶剂(乙醇一氯仿)的方法进行猪血SOD粗酶液的制备， 用葡聚糖G 100-G50进行串连柱层析，所用猪血5000m1，可得SOD纯bAA约275.
6mg，比活力达4700U的mg左右，纯化倍数约31倍左右，总活力回收率约70%。纯化后的两种样品经聚丙烯酚胺凝胶电泳鉴宁和酶活性测定，结果表明:两种方法分离纯化的SOD纯度高....................35页
5、玉米超氧化物歧化酶SOD提取与纯化技术
以玉米湿法加工淀粉的副产物玉米胚芽为原料，可延长玉米产业链，实现玉米深加工副产物的高附加值综合利用，大幅度提高了玉米深加工企业经济效益，是从根本上解决吉林省玉米问题的有效途径之一。玉米胚在玉米籽粒中仅占10～13％,但却是玉米SOD主要存在部位，胚和胚乳中SOD的比值为1.9，说明胚里的SOD含量远高于胚乳。因此，从玉米胚中提取SOD，不仅使SOD提取工作量减轻，也使玉米综合利用更合理。以玉米湿法加工淀粉的副产物玉米胚芽为原料，经超临界CO2流体萃取脱脂，低温超细粉碎使玉米胚芽粉达到粒度要求，利用超声波提取的方....................50页
6、双水相萃取法从桑蚕蛹等三种原料中提取SOD工艺
以条件温和、产品活性损失小、处理量大，分离步骤少，无有机溶剂残留等优点的双水相萃取分离法在黄粉虫、啤酒酵母和桑蚕蛹三种原料中，进行提取纯化SOD比较研究。确定了双水相筚取提取SOD工艺流程，研究了双水相体系最佳条件：提取黄粉虫和蚕蛹中SOD最佳双水相体系的质量组成为聚乙二醇浓度12％，磷酸钾浓度24％，pH7.1；提取啤酒酵母SOD最佳双水相体系的质量组成为聚乙二醇浓度10％，磷酸钾浓度24％，pH7.3。在此条件下测定出黄粉虫中提取的SOD比活力达到3.7
U·mg-1蛋白质，SOD纯化倍数达3.74，酶活性回收率达71％；啤酒酵母中提取....................48页
7、树莓超氧化物歧化酶的分离纯化与其部分性质
以树莓为原料，通过盐析、凝胶层析、离子交换和金属螯合亲和层析等步骤对树莓SOD进行纯化，并对其部分性质进行研究。这些为树莓SOD的进一步深入研究及其在药品、保健食品和化妆品的应用中打下了一定基础。首先对抽提缓冲液的pH值、抽提体积和抽提次数进行优化，得出最佳的抽提条件：pH值为7.8，抽提体积为三倍，抽提次数为两次。同时通过(NH4)2SO4盐析沉淀实现分级分离，考察了不同饱和度(NH4)2SO4沉淀的酶活力，得出(NH4)2SO4饱和度为50～90％时，能够达到最大酶活。然后利用凝胶层析初步纯化树莓SOD。纯化条件：柱体1.6×60cm；磷
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8、牛血SOD的分离纯化与性质研究
SOD(超氧化物歧化酶的简称)是一种抗氧化酶,它所催化反应的作用底物是氧自由基(O_2~-),因而它是作用机制很清楚的氧自由基清除剂,而自由基又是人体代谢过程中最主要的破坏分子,也就是说机体的生老病死与自由基的关系最大。以牛血为材料,对血液中的SOD进行了提取、分离和纯化等研究,不同于以往的有机溶剂如丙酮、乙醇—氯仿等沉淀提取、柱层析纯化等方法,同时探讨了工艺的稳定性及可行性,从而解决集中屠宰带来的大量血污染问题,又给人类的健康带来保障。主要技术在于无机溶剂(氯化铜)提取等分离纯化,经过多次试验,证明该工艺提取的SOD粗酶液收率高,而经乙醇—硫酸铵变性沉淀所得的SOD产品比活大,较以往的有机溶剂提取生产周期短,成本低,无有机溶剂的毒副作用,该工....................40页
9、家蚕超氧化物歧化酶分离纯化与其基因克隆
进行了家蚕S0D的分离统化，并对其末端进行序列分析，然后根据末端的分析结果设计、合成引物，通过RT-PCR法扩增家蚕SOD的cDNA，并克隆获得了SOD基因，为SOD的应用奠定了基础。现将研究结果报告于下：1.分离纯化
通过SOD活性与同工酶调查研究，结果表明家蚕SOD是受多基因支配的，而且有主基因控制。根据SOD活性与同工酶调查结果确定实验材料。采集家蚕体液，置-70℃的低温冰箱保存备用。家蚕体液经过热变性后离心得.......................55页
10、对从猪血中提取超氧化物歧化酶的工艺改进与其肠溶小丸研制
按照药典肠溶胶囊的有关要求,进行了以下主要研究:应用单因素筛选和正交实验的方法进行了有效部位的提取研究,以三因素实验方法对猪血中提取SOD
酶的工艺进行了改进,制得了工艺可行,质量稳定、可控的SOD 提取物。在制剂过程中,以乙基纤维素(EC)和糊精为原料,采用了淀粉内外同加的方法,以泛制法制备了本小丸,并以丙烯酸树脂III号乙醇溶液包衣了该小丸,并对小丸性质进行了研究。按照《中华人民共和国药典》2000
版第一部(附录I LD)....................68页
11、大蒜超氧化物歧化酶的提取与纯化与性质研究
探讨了从大蒜中提取与纯化Cu,Zn-SOD的工艺路线、优化条件、纯化效果及大蒜SOD的生化性质.酶活测定方法采用邻苯三酚法.对邻苯三酚法测SOD活力进行了优化:EDTA对邻三酚的自氧化有抑制作用,邻苯三酚自氧化速度测定体系中HCl-Tris缓冲溶液所采用的EDTA的浓度为0.1mmol/L;HCl-Tris缓冲溶液的pH值与邻苯三酚溶液的浓度对邻苯三酚自氧化速度皆有影响,经条件优化后,最终采用pH8.2的HCl-Tris缓冲溶液,及,邻苯三酚溶液的浓度采用3mmol/L.研究了大蒜SOD的多次提取效果,确立了二次提取法.研究比较了氯仿—乙醇沉淀法....................40页
12、大蒜超氧化物歧化酶分离纯化
研究了大蒜SOD分离纯化的方法,探讨了氯仿-乙醇沉淀、热变性、等电点沉淀、盐析以及丙酮沉淀等制备方法,结果表明:热变性法能有效的除去杂蛋白,酶活收率也很高,是一种简便、高效的纯化方法;氯仿-乙醇沉淀可以较好的去除杂蛋白,效果和热变性法相当,但氯仿有较大毒性;等电点沉淀法纯化效果不佳;盐析法需要消耗大量的盐,不能回收利用;丙酮沉淀法可以起到很好的纯化和浓缩作用,酶液中残留的丙酮可以通过低温冻干除去,是一种高效的纯化手段.确定了"二次提取→热处理→丙酮二级沉淀→-20℃冻干→少量PBS溶解"的SOD粗品制备方案.大蒜SOD的精制采用金属螯....................50页
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