1、DHA固体脂质纳米颗粒(SLN)制备、性质及应用
对比两种制备DHA固体脂质纳米颗粒的方法，寻找每个方法的优点和方式。本研究采用单硬脂酸甘油脂作为壁材，对藻油中的DHA进行包埋，通过单因素实验和响应面实验研究DHA固体脂质纳米颗粒制备过程中影响因素，以包封率为指标确定最佳制备工艺参数；对DHA固体脂质纳米颗粒的理化性质进行分析，得到制备DHA固体脂质纳米颗粒，并将DHA固体脂质纳米颗粒应用于乳制品加工中。本研究的主要研究结果如下：1.研究了高压均质法和熔融超声法两种方法制备DHA固体脂质纳米颗粒的最佳工艺。高压均质法的最佳工艺参数：芯-壁比1:65，均质强度80MPa，乳化剂质量百分数2.14%，均质次数8次，包封率75.41%；熔融超声法的工艺参数：芯-壁比1:63，均质强度113.8MHz，乳化剂浓度2.10%..............共52页
2、DHA合成工艺研究
国内主要采用微生物发酵法,该法具有条件温和,专一性强的优点,但是产物浓度低,造成后续的分离提纯工艺复杂以及生产装置的制备难度高,大大提高了生产成本且造成了环境污染。用甲醛聚糖法合成制取DHA,原料廉价易得,工艺条件简单,但是反应的选择性较低,产物化学性质相似造成后续的分离较难,在国外这些问题已经被探索并得到解决,已经成功的进行了中试,在我国还没有取得实质性的进展。本论文中,通过化学合成法合成并表征了目标产物DHA,初步探讨了催化剂和产品的合成条件,为本产品的进一步开发研究打下了良好基础。实验主要部分:第一,研究H2O2氧化法将二巯基苯并噻唑氧化为苯并噻唑的具体工艺,从反应原料的浓度、反应温度、时间、酸化时间四个方面优化了合成工艺,收率达到了..............共40页
3、DHA微乳制备及质量评价
采用转相乳化法制备DHA微乳,建立了微乳和血浆中DHA含量的HPLC检测方法。在筛选微乳配方基础上,借助伪三元相图的方法考察了DHA微乳形成的影响因素,最终确定了包封率较高,载药量较大的最优配方。并对制备的DHA微乳的理化性质和质量稳定性进行了研究。主要研究及结果如下：1.建立了微乳和血浆中DHA含量的HPLC检测方法用高效液相色谱仪,对其吸收波长、标准曲线、回收率、精密度、重复性等进行研究。结果表明,DHA在215nm处有最大吸收,微乳中DHA在14.06449.92μg/mL内呈良好的线性关系(R2=0.9997),平均回收率为101.56%RSD=2.11%(n=6)。实验结果表明该方法可靠、简便、重现性好,可作为微乳中DHA含量测定。血浆中DHA在5.59-357.50μg/mL血药浓度范围内线性关系良好,其不同浓..............共45页
4、二十二碳六烯酸(DHA)发酵工艺的研究
对裂殖壶菌做了以下研究：首先对初始菌株进行复壮与自然分离，经过初筛、复筛及传代稳定性实验，得到菌株Sc-16作为紫外诱变的出发菌株。随后进行紫外诱变育种，综合考虑发酵效价及传代稳定性，选择菌株UV-28作为后续实验的出发菌株。菌株UV-28的发酵水平为4261μg/mL，是初始菌株发酵效价的1.28倍。同时考察了Schizochytriumsp.的最佳保藏方法为甘油管低温保藏法。接着对初始的斜面培养基、种子培养基、发酵培养基及其培养条件进行了优化，通过优化实验得到了最佳的发酵培养基配方（g/100mL）：葡萄糖12.6，震元蛋白胨1.7，胰蛋白胨0.5，海盐1.2，微量元素Ⅰ0.2，维生素0.2，微量元素Ⅱ0.1，谷氨酸钠0.1。并确定了较优的培养条件为pH5.6，摇瓶装液量35mL/250mL，接..............共53页
5、二十二碳六烯酸甘油酯微囊的制备工艺及其稳定性的研究
选取DHA甘油酯作为研究对象,针对它们在水溶性及稳定性方面的不足,采用喷雾干燥法制备DHA甘油酯微囊,拓展它们的应用范围。喷雾干燥法制备DHA甘油酯微囊,并评价其质量。以载药量和包封率作为综合评价指标,通过对微囊制备处方的筛选及各种影响因素的考察,确定了最佳工艺条件：以阿拉伯胶和明胶作为复合囊材,它们的比例为1：1芯材比为1：5,HLB值为11,表面活性剂的量为0.6g,水浴温度为40℃,搅拌时间为1h,V(丙酮)：V(水)为1：5,溶剂用量为300m1,进风温度为150℃,雾化压力为0.1MPR.进样速度为0.5L/h,进风量为0.42m3/min,包封率(93.15±0.36)%,载药量为(13.68±0.31)%。选择不同的水溶性壁材来制备DHA甘油酯微囊,同样以载药量和包封率作为综合评价指标,最终确定的最适处方工艺为..............共66页
6、二十二碳六烯酸-磷脂生物活性的研究
利用从鸢乌贼卵中提取制备的DHA–磷脂(其中PC含量为64.4%,脂肪酸组成中DHA占30%–40%),探讨了DHA–PC的抗肿瘤活性及其作用机制;DHA–PC的免疫调节作用;DHA–PC对小鼠智力的影响以及对正常小鼠脂质代谢的调节作用。主要研究结果如下:以肝癌细胞HepG–2为研究对象,研究了DHA–PC的体外抗肿瘤作用。采用MTT法证明了DHA–PC能够显著抑制HepG–2细胞的增殖(P0.05,P0.01),具有显著的时效和量效关系;采用AO/EB染色法证明DHA–PC能够诱导细胞出现明显的凋亡形态;采用流式细胞术检测证明DHA–PC可以改变细胞的周期,使细胞停滞在G1/G0期。提示DHA–PC对肿瘤细胞的生长有明显的抑制作用,诱导细胞凋亡和细胞G1/G0期阻滞是其主要机制。采用细胞–基质粘附实验法、划痕..............共50页
7、富油微藻中油脂的提取及DHA富集纯化的研究
建立了微藻油脂的气相色谱内标分析方法,对微藻中的DHA含量进行定量分析。采用索氏提取法提取微藻油脂,考察了不同极性溶剂、提取时间等因素的影响。综合考虑油脂得率和溶剂的安全性,选择95%乙醇作为适宜溶剂,适宜的提取时间为8h,该条件下油脂提取率达到44.87%,DHA含量为15.73%,DHA提取率7.06%。实验结果还显示,不同提取溶剂提取的油脂中DHA含量相差不大。超声和微波辐射两种预处理方法均能使微藻油脂提取率有显著提高,达到60%以上,同时具有处理时间短、操作方便的优点。在特定超声处理条件下(80W,15min),油脂中DHA含量提高到24.77%;但微波预处理方法则导致DHA含量普遍下降。因此,两种预处理方法中,超声法适用于从微藻中提取DHA;但从获得微藻油脂生产生物柴油角度考虑,超声和微..............共52页
8、高产二十二碳六烯酸隐甲藻的选育及发酵特性研究
首先研究了隐甲藻藻种的最适保存方法；采用亚硝基胍对原始藻种进行诱变处理，筛选出一株遗传性状稳定的高产藻株；全面系统的考察了影响其生长和二十二碳六烯酸合成的主要因素，明确了一些关键因素的最优水平；最后进行了高产藻株的分批补料发酵试验。采用低温冷藏和低温黑暗两种保存方法对隐甲藻ATCC30556进行保存处理，并加入20%的甘油作为冷冻保护剂，90天后以藻种存活率、再生长能力为评价指标，确定了藻种的最佳保存方法为低温黑暗保存。采用此种方法进行保存处理，藻种的存活率达到了82.4%，且再生能力强，发酵能力实验表明藻种未出现退化现象。选用不同剂量的亚硝基胍对出发藻株进行诱变处理，确定了适宜的诱变剂量，通过30℃高温培养初筛，摇瓶发酵复筛的选育方法..............共64页
9、高密度培养裂殖壶菌生产二十二碳六烯酸
主要研究了如何实现裂殖壶菌的高密度培养的相关工艺和过程。首先,对DHA提取方法进行研究,确定了125℃干燥3h的高温干燥方法为较优的破胞方法,该法既保证充分破胞,又有利于DHA的提取。通过各种脂质提取方法的比较,得出一种新的脂质提取方法一酸性正己烷法,即菌体经过高温干燥后,先用盐酸水解,再用正己烷萃取,该方法实现了脂质的充分、高效提取。其次,通过5L德国贝朗发酵罐对裂殖壶菌进行培养,优化pH、溶氧等发酵条件,确定了较优的间歇培养发酵条件:温度25℃,pH5.5,溶氧水平30%,通气量4L/min。此条件下,最终的生物量、脂肪酸和DHA含量分别为36.7g/L、23.8g/L和5.4g/L,比优化前分别提高了10.0%,16.7%和38.6%,DHA平均产率r_(DHA)为56.8mg/(h.L)。然后,根据裂殖壶菌间..............共44页
10、固定化磷脂酶催化制备二十二碳六烯酸型磷脂
首先以DHA在反应产物中的含量为指标,利用单因素法优化了固定化磷脂酶A1(PLA1)催化富含磷脂酰胆碱(PC)磷脂与DHA酸解的反应条件。详细研究了底物摩尔比(DHA/PC)、反应温度、加酶量等对反应的影响,发现在40℃、底物比为4：1、加酶量为底物总质量20%、溶剂用量为4mL、反应时间2h条件下DHA在产物中含量较高,随后进一步利用响应面法继续优化反应条件,最终得到的最优条件为：底物比4.4：1、反应温度40℃、加酶量21%、溶剂用量4mL、反应时间2.4h,DHA含量达到17.5mg/g。然后又以DHA在反应产物中的含量为指标,利用单因素法优化了固定化PLA1催化粉末磷脂与DHA酸解的反应条件。详细研究了底物比、反应温度、加酶量等对反应的影响,发现在45℃、底物摩尔比(DHA/PL)为10：1、加酶量..............共52页
11、裂殖壶菌DHA油脂分离提取技术研究
12、裂殖壶菌发酵制备二十二碳六烯酸（DHA）过程的初步研究
13、裂殖壶菌高产DHA的发酵技术研究
14、水分散性DHA乳油制备及稳定性研究
15、微胶囊化藻油DHA的稳态化研究
16、藻油DHA微胶囊的乳化喷雾干燥法制备及在乳品中的应用
17、018049249B 用于水生物种的富含二十二碳六烯酸的可捕食生物的培养方法 1-14
18、018092128A 二十二碳六烯酸作为维甲酸X受体及其用途 1-13
19、031133975B 从卤虾粉提取、制备、纯化二十二碳六烯酸乙酯的方法 1-5
20、038227061B 用于增强认知能力的含有花生四烯酸或其与二十二碳六烯酸的组合的组合物 1-26
21、941046494A 含二十二碳六烯酸的微藻食物原料及其食品和生产方法 1-21
22、941066215A 培养海洋微藻及用其生产二十二碳六烯酸的方法 1-22
23、951063324B 低二十碳五烯酸高二十二碳六烯酸鸡蛋及生产方法和用途 1-7
24、961026936A 天然珍珠蚌内脏全成分水解液及二十二碳六烯酸二十碳五烯的制备方法 1-12
25、971081360A 二十二碳六烯酸的制备和酯化工艺 1-5
26、971934460B 包含花生四烯酸和二十二碳六烯酸的肠制剂或营养增补剂 1-39
27、988055694B 二十二碳六烯酸和花生四烯酸促进不足月婴儿生长的用途 1-81
28、991154290A 二十二碳六烯酸乙酯和二十碳五烯酸乙酯的制备和分离工艺 1-5
29、2003801049975B 二十二碳六烯酸作为活性物质治疗脂肪代谢障碍的用途 1-8
30、2004100675484A 二十碳五烯酸乙酯和二十二碳六烯酸乙酯分离制备方法 1-15
31、2005100044886A 二十二碳六烯酸和花生四烯酸促进不足月婴儿生长的用途 1-86
32、2005800457798A 解脂耶氏酵母的二十二碳六烯酸生产菌株 1-263
33、2005800483218A 在酵母中重组生产二十二碳六烯酸(DHA) 1-66
34、2005800490527A 含有二十碳五烯酸(EPA)和二十二碳六烯酸(DHA)的协同热稳定油介质 1-19
35、200580052523XA 生产二十二碳六烯酸(DHA)的破囊壶菌菌株－SC1 1-27
36、2006100828385B 含有二十二碳六烯酸的食用调和油 1-11
37、2006101254763A 用寇氏隐甲藻发酵生产二十二碳六烯酸油脂的方法 1-14
38、2006800396657B 包含二十二碳六烯酸和脂色素的婴儿配方 1-22
39、2007800069842A 二十二碳六烯酸和花生四烯酸在制备用于预防或治疗肥胖症的组合物中的用途 1-22
40、2007800204524A 包含二十二碳六烯酸的饲料制剂 1-32
41、2008100162231A 一种提取富含二十碳五烯酸及二十二碳六烯酸磷脂的方法 1-12
42、2008100473480B 微米级花生四烯酸 二十二碳六烯酸乳状液及其制备方法 1-13
43、2008100473495B 一种微米级二十二碳六烯酸乳状液及其制备方法 1-14
44、2008100478592B 生物酶法破壁用于二十二碳六烯酸油脂生产方法 1-6
45、2008100528394B 二十二碳五烯酸甲酯和二十二碳六烯酸甲酯的制备和分离方法 1-8
46、2008100528407B 以微藻油生产二十二碳五烯酸和二十二碳六烯酸混合脂肪酸的方法 1-7
47、2009100334938B 一种二十二碳六烯酸生产菌株及其诱变筛选方法和其应用 1-8
48、2009100607225B 酶法酯交换生产含二十二碳六烯酸的食用油脂的方法 1-5
49、2009100614197B 用裂殖壶菌发酵生产二十二碳六烯酸的方法 1-14
50、2009100618338B 用寇氏隐甲藻工业化发酵生产二十二碳六烯酸的方法 1-12
51、2009100726243B 薄膜蒸发-冷冻干燥包埋二十二碳六烯酸的方法 1-8
52、2009101116574A 一种从裂殖壶菌提取并精制富含二十二碳六烯酸的方法 1-16
53、2010101822221B 一种提取二十二碳六烯酸油脂的方法 1-7
54、2010102312457A 二十二碳六烯酸的制备方法 1-12
55、2010105046357B 外源添加因子促进微生物合成二十二碳六烯酸的方法 1-9
56、2010105747770A 一种含有二十二碳六烯酸的配制型含乳饮料及其生产方法 1-14
57、2010800094475A 发酵生产二十二碳六烯酸的改进方法 1-19
58、2010800239775B 获得二十碳五烯酸和二十二碳六烯酸的酯的浓缩物的方法 1-24
59、2010800600937A 包含含二十二碳六烯酸的水果片的营养组合物 1-8
60、2011101382705A 一种利用离子束生物工程诱变微藻生产二十二碳六烯酸的方法 1-5
61、2011103246902A 一种生产二十二碳六烯酸乙酯（DHA-EE）的方法 1-11
62、201110433100XB 检测蛋黄油中二十二碳六烯酸含量的方法 1-9
63、2011104479577B 新型二十二碳六烯酸（DHA）脂肪乳制剂配方和制备方法 1-13
64、2011800368732B 泛醇基二十二碳六烯酸酯及其治疗和预防心血管疾病的用途 1-11
65、2012103791477B 二十二碳六烯酸微胶囊二次包埋方法 1-17
66、2012103809004B 一株产二十二碳六烯酸的裂殖壶菌菌株 1-10
67、201310096170XA 包含二十二碳六烯酸和叶黄素的婴儿配方 1-22
68、201310096205XA 包含二十二碳六烯酸和叶黄素的婴儿配方 1-22
69、2013103194216B 一种从微藻油或鱼油中分离纯化二十碳五烯酸酯和二十二碳六烯酸酯的方法 1-8
70、201310319463XB 一种从微藻油或鱼油中分离纯化二十碳五烯酸和二十二碳六烯酸的方法 1-8
71、2013104755152B 共轭亚油酸与二十二碳六烯酸微胶囊化粉末及其制备方法及应用 1-7
72、2013104872917B 一种裂殖壶菌及用于生产二十二碳六烯酸油脂的方法 1-13
73、2013105714130B 利用秸秆水解液发酵生产二十二碳六烯酸的方法 1-13
74、2013106768617A 一种二十二碳六烯酸-甘氨酸-甘油复合型人精液冷冻保护剂及其制备方法 1-9
75、201310710525XB 一种富含二十二碳六烯酸的结构油脂及其制备方法 1-10
76、2013800141639A 通过裂殖壶菌属物种以兼养方式生产二十二碳六烯酸和虾青素 1-12
77、2014100040850A 一种制备脂肪酸胶体溶液应用于隐甲藻生产二十二碳六烯酸的方法 1-7
78、2014100970633A 一种利用裂殖壶菌生产二十二碳六烯酸的方法 1-11
79、2014102799678A sn-2位为二十二碳六烯酸的磷脂酰丝氨酸的制备方法 1-26
80、2014104273065A 一种纳米级二十二碳六烯酸乳状液及其制备方法 1-8
81、2014104273328A 一种富含二十二碳六烯酸的饲料 1-4
82、2014105679625A 一种利用餐厨垃圾制备的饲用二十二碳六烯酸添加剂及其制备方法 1-12
83、2014106679887A 一种提高裂殖壶菌油脂中二十二碳六烯酸含量的方法 1-13
84、2014107173641A 一种从鰤鱼中提取二十二碳六烯酸和二十碳五烯酸的方法 1-7
85、2014107962977A 包含二十二碳六烯酸的提取的植物脂质 1-230
86、2014108570338A 一种从藻油中提纯二十二碳六烯酸乙酯的方法 1-5
87、2015100553127A 多种化学促进剂提高微生物异养发酵生产二十二碳六烯酸的方法 1-9
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