1、产河豚毒素微生物的研究
1、从河豚鱼的卵巢中分离出35株野生菌,其中15株菌株遗传性状稳定。用小鼠生物检测法对15株菌株的发酵产物进行了检测,初筛选出11菌株进行复筛,结果有6株菌毒素含量均在400ng/ml,其中菌株B-333毒素含量最高为489.40ng/ml,因此选择菌株B-333作为出发菌株,并命名为ZY-23。2、通过对ZY-23菌株的形态特征、培养特征、生理生化特征进行了研究与分析。结果表明,ZY-23菌株具有沙雷氏菌的典型的形态特征和生理生化特征。该菌株最适生长温度26℃,最适pH7.0,最适Nacl浓度2%。3、通过提取ZY-23菌株的基因组DNA,利用16SrRNA基因通用引物,进行扩增、转化感受态大肠杆菌,将阳性克隆测序,获得ZY-23菌株的16SrRNA基因序列,构建进化树,证实ZY-23菌株与Serratiasp.Tp5有99%的同源性。4、通过................共46页
2、海藻希瓦氏菌发酵产生河豚毒素的提取与检测
从结构和生物学功能上证实,海藻希瓦氏菌发酵产生的TTX与河豚组织中的TTX是一致的,为TTX微生物起源假说奠定坚实的实验基础。优化海藻希瓦氏菌生产河豚毒素的发酵条件,细致研究海藻希瓦氏菌产生河豚毒素的分离纯化工作,为可持续生产TTX提供新思路。本文对海藻希瓦氏菌生理生化指标进行了测定。通过测定菌体密度和菌体收获量,研究了部分初始条件及添加不同营养物质对海藻希瓦氏菌生长的影响,采用单因素试验和正交试验对海藻希瓦氏菌生产河豚毒素的发酵条件进行了优化。优化后的培养基最佳配方为:在2216E培养基中添加1.0%葡萄糖、2.5%酵母粉、1.0%磷酸高铁。统计分析,葡萄糖是影响海藻希瓦氏菌菌体收获量的主要因素。采用SCM杯式超滤系统对海藻希瓦氏菌发酵液的过滤除杂................共55页
3、河豚毒素的快速检测方法研究
利用酶的高度选择性，通过检测TTX的衍生物来检测TTX。即将TTX用碱处理，反应生成C_9碱与草酸盐，通过草酸氧化酶与辣根过氧化物酶来检测草酸盐。草酸盐的生成量与TTX的量成比例关系，从而可以由草酸盐的检测结果推断出TTX的含量。该方法的检测限为2.5μmol／L，线性范围为4.5μmol／L-45μmol／L，批内与批间变异系数；≤10％。此方法为国内外首创的方法。该类方法利用了酶的高度选择能力，可以保证检测的特异性。同时酶法检测时间短，过程易控制，对提取操作要求低，不需要昂贵的仪器设备。该方法可作为一种快速的筛选方法。第二种方法是免疫学方法，即通过制备TTX的单克隆抗体或抗血清，以酶联免疫吸附检测法检测TTX。本研究使用甲醛将TTX与匙孔槭血蓝蛋白交联，通过................共42页
4、河豚毒素的提取和分离纯化工艺研究
采集的河豚鱼共12种,主要为腹刺纯属和东方纯属,其中腹刺纯属是主导鱼类,占总样本量的75.8%；TTX在河豚鱼种和鱼体不同部位间的分布差异极显著,主要集中在卵巢和肝脏,皮和肌肉多数为无毒或弱毒,而月腹刺纯全鱼有毒,卵巢毒力高达251.4MU,是最佳的提毒原料。2、采用L9(34)正交试验和响应面分析法对传统水浴法和超声辅助法提取月腹刺纯卵巢TTX的工艺条件进行了优化和比较,结果表明：以0.1%的乙酸为提取溶剂,液料比4：1,80℃水浴下提取2次(10min/次),月腹刺纯卵巢TTX的得率为50.23μg/g；液料比3：1,超声频率40kHz,功率40W,40℃水浴下提取1次(22mmin/次),月腹刺纯卵巢TTX的得率为63.57μg/g,比传统水浴提取法提高26.6%。3、以超声辅助法提取的TTX粗提液为原料,.................共40页
5、河豚毒素提取及检测
河豚毒素（简写为TTX）是一种主要存在于河豚鱼体内的剧毒活性物质（毒性约为氰化钠的1000-1500倍）,因此经常出现误食或食用过量河豚鱼而导致中毒,甚至死亡事件的发生.由此,建立一套简便及切实可行的检测方法至关重要.同时,河豚毒素还具有一定的药用经济和科学研究价值（主要是在镇痛及药理学研究中）,特别是近年来有关其解毒、镇痉作用方面的研究已引起广大学者的普遍重视.作为中国每年水产养殖业及水产品出口重要组成中的一部分,大量河豚鱼是以半成品鱼方式出口日本、韩国等地,残留下大量河豚鱼内脏等下脚料并作为废品扔掉.而从废弃的河豚鱼内脏中提取河豚毒素不仅可以实现经济价值的回收和增值,而且还可为相关河豚毒素药理及应用开发研究提供基本的材料来源................共53页
6、酒曲生物转化河豚毒素的初步研究
河豚毒素(简写为TTX)是一种氨基全羟基喹唑啉化合物，通常以“两性离子”的形式存在，是豚毒鱼类及其他生物体内含有的一种生物碱，也是一种剧毒的非蛋白质天然神经毒素。河豚毒素不仅存在于许多脊椎动物和无脊椎动物体内或体表，也存在于很多海洋微生物中。目前国内外尚无微生物来源的TTX合成方面的详细报道，而与TTX有类似结构和类似性质的石房蛤毒素和膝沟藻毒素的微生物合成均与精氨酸和乙酸的代谢有关，这些为TTX的微生物合成提供了参考。综述微生物转化TTX的类似结构化合物的研究成果，以此为基础探讨微生物转化TTX使之由剧毒变为毒性减弱乃至无毒的可能性，并展望微生物转化TTX的发展趋势。对河豚毒素进行转化实验，并利用传统的HPLC-PDA检测法与IC-UV-VIS检................共60页
7、膜分离技术在河豚毒素纯化及浓缩中的应用研究
膜分离技术作为一种高新技术,发展非常迅速,而在目前化学方法分离纯化河豚毒素过程中,河豚毒素分离纯化工艺复杂,回收率低,费时费力。正迫切需求高新的下游技术来改造传统的分离纯化工艺。本论文就河豚毒素的超滤、纳滤、反渗透过程进行了平板膜小试和卷式膜小试研究。主要结果如下:我们对河豚毒素膜分离前处理过程进行了研究,得出了合适的前处理条件:平板膜小试为醋酸水浸提、加热除蛋白、滤纸过滤、G5过滤。卷式膜小试过程为醋酸水浸提,滤纸过滤,1μm滤袋过滤。平板膜小试纯化及浓缩河豚毒素实验。实验结果表明:超滤过程选择0.22MPa作为操作压力。2万超滤过程后杂质除去率为23.5%,河豚毒素溶质截留率为5.2%。1千超滤过程杂质除去率为21.5%,河豚毒素溶质截留率为................共46页
8、00136693.9A 获得脱水河豚毒素的方法 1-20
9、01142658.6A 提取河豚毒素的方法 1-7
10、02121463.8A 河豚毒素高纯单体规模化制备方法 1-10
11、02123142.7A 一种河豚毒素偶联物及含有该偶联物的药物组合物 1-18
12、03133530.6A 一种从河豚中分离产生河豚毒素的微生物的方法 1-6
13、03137618.5A 微生物源河豚毒素的制备方法 1-7
14、03138706.3A 高效液相法精制河豚毒素的方法 1-5
15、03138707.1A 从河豚鱼肝脏提取河豚毒素的方法 1-5
16、03146020.8A 稳定的医药用河豚毒素冷冻干燥制剂 1-19
17、200410036380.0A 草酸氧化酶法检测河豚毒素 1-3
18、200410065385.6A 一种制备河豚毒素水提液的方法 1-5
19、200410102449.5A 河豚毒素衍生物的制备和戒毒镇痛用途 1-20
20、200420109267.6A 一种河豚毒素水提液过滤装置 1-6
21、200510002904.9A 一种微生物发酵法生产河豚毒素的方法 1-13
22、200510013115.5A 二步树脂法制备河豚毒素的方法及河豚毒素制剂 1-9
23、200510013116.A 标记河豚毒素及其制备方法和应用 1-9
24、200580020376.8A 河豚毒素的固体口服制剂 1-31
25、200580031751.9A 河豚毒素及其衍生物用于治疗中枢神经源性神经痛 1-15
26、200580031979.8A 河豚毒素及其衍生物用于治疗外周神经源性神经痛 1-16
27、200710011352.7A 复方外用河豚毒素油膏及其制备方法 1-13
28、200710086563.7A 室温稳定的注射用河豚毒素制剂 1-14
29、200810072070.2A 脱水河豚毒素高纯单体的制备方法 1-17
30、200810127045.A 一种用于戒毒、镇痛的河豚毒素制剂 1-26
31、200810211203.5A 河豚毒素冻干粉针制剂及其制备方法 1-31
32、200880005935.1A 河豚毒素的生物合成方法 1-11
33、200910010304.5A 河豚毒素的提取、及河豚毒素用于杜冷丁类药物依赖的制剂 1-19
34、200910112755.5A 产河豚毒素的堀越氏芽孢杆菌及其分离方法与应用 1-8
35、201010105939.6A 一种河豚毒素的人工抗原、相应的特异性抗体及其制备方法与应用 1-10
36、201010179363.8A 产河豚毒素的气单胞菌从暗纹东方鲀组织分离、发酵培养和所产河豚毒素的检测方法 1-12
37、201010227994.2A 一种河豚毒素的制备方法 1-20
38、201080044136.2A 获得河豚毒素的可持续的方法 1-9
39、201110020401.A 一种高纯度河豚毒素的提取方法 1-6
40、201110027079.3A 一种基因工程单链抗体检测河豚毒素的试剂盒及方法 1-9
41、201110299711.A 微生物共栖培养发酵生产河豚毒素的方法 1-6
42、201110361403.5A 一种免疫亲和层析介质的制备方法及在纯化河豚毒素中的应用 1-7
43、201210309534.3A 一种河豚毒素口服液态制剂及其制备方法 1-7
44、201210459177.9A 河豚毒素贴膜及其一种制备方法 1-6
45、201220077361.2A 一种检测河豚毒素的胶体金免疫层析试纸 1-7
46、201310007344.0A 一种能特异结合河豚毒素的DNA适配子及其应用 1-11
47、98102596.A 脱水河豚毒素的提取方法 1-5
48、201310135898.9A 降解河豚毒素的提取液及其制备方法 1-13
49、2015104810765A 具有抗心律失常作用的河豚毒素复方制剂及其制备方法 1-10
50、2013101721667A 一种半定量河豚毒素检测卡的制作方法 1-8
51、2014101817927A 一种河豚毒素柱前衍生-高效液相荧光检测方法及基于该方法的试剂盒 1-7
52、2014102518941A 一种河豚毒素检测试剂盒 1-7
53、2014104539162A 一种提取和初步纯化河豚毒素的方法 1-10
54、2014105706834A 一组产河豚毒素的海洋细菌组合 1-7
55、2014105731380A 一种制备河豚毒素的方法 1-10
56、2014106033085A 免疫亲和柱净化-液相色谱-串联质谱测定海洋生物中河豚毒素的方法 1-12
57、2014106177096A 一种河豚毒素的快速检测传感器 1-8
58、2014107690633A 抗河豚毒素单链抗体及其制备方法 1-14
59、2015100043406A 高纯度河豚毒素的提取方法 1-6
60、2015102201103A 一种河豚毒素的检测方法 1-16
河豚毒素提取制备应用文献资料
61、7种有机酸溶液中河豚毒素的稳定性研究
62、HPLC法测定河豚毒素的含量及稳定性
63、超声波辅助提取河豚毒素的研究
64、低毒河豚鱼毒素的提取和检测
65、反相离子对高效液相-PDA法测定虫纹东方鲀肝脏中的河豚毒素
66、高效液相色谱-紫外／荧光检测方法测定河豚毒素
67、海洋生物毒素研究新进展
68、海洋细菌B3B产河豚毒素特性的鉴定及其发酵培养基优化
69、河豚毒素（TTX）产生菌株CZ-312的研究
70、河豚毒素标准样品的研制
71、河豚毒素的HPLC方法检测
72、河豚毒素的抽取方法
73、河豚毒素的毒性控制和应用前景
74、河豚毒素的分离纯化研究
75、河豚毒素的理论及应用研究进展
76、河豚毒素的起源及其研究进展
77、河豚毒素的提取及检测方法研究
78、河豚毒素的研究进展
79、河豚毒素的医药开发前景
80、河豚毒素及其分离纯化研究进展
81、河豚毒素及其类似物的研究概况
82、河豚毒素检测方法的研究进展
83、河豚毒素检测原理与发展趋势
84、河豚毒素两种定量检测方法的比较研究
85、河豚毒素生态作用研究进展
86、河豚毒素细菌合成实验方法研究
87、河豚毒素与阿司匹林的协同镇痛作用
88、河豚鱼毒素定性定量分析检测
89、堀越氏芽孢杆菌S184产河豚毒素的发酵条件优化
90、南海常见河豚鱼品种及其毒素含量的研究
91、梭形芽孢杆菌(Bacillus fusiforms)N141发酵产河豚毒素的研究
92、微波辅助碱解荧光分光光度法快速测定河豚毒素含量
93、微生物传感器测定河豚毒素研究
94、液相色谱-电喷雾离子阱质谱联用分析河豚毒素
95、一种高效制备河豚毒素（TTX）方法的研究
96、正交试验法优选超声提取河豚毒素的研究
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