1、Stock6杂交诱导玉米单倍体的选育与鉴定
单倍体育种是利用自然发生或人工培育的单倍体，经染色体加倍获得纯合二倍体，再从中选育自交系的方法。利用单倍体方法育种可极大缩短自交系选育年限。目前，利用Stock6杂交诱导单倍体是最常用的快速选育自交系的有效方法。本研究以一套引进的Stock6为诱导单倍体材料，研究了Stock6与不同基因型母本杂交诱导单倍体的差异，比较了几种单倍体的鉴定方法，调查了利用Stock6杂交诱导获得的单倍体雌、雄育性自然恢复情况，并对不同浓度秋水仙素处理单倍体后的加倍效果进行了初步探索。主要研究结果如下：1 通过对Stock6自交后代的选择研究表明，随着Stock6自交代数的增加，Stock6自交拟单倍体诱导率为0穗行随之增加，从第1代的30％增加到第5代的88％，平均每代选
2、矮牵牛F1代育种的几个相关技术研究
探讨了适合矮牵牛花粉生命力测定的液体培养基和快速测定生命力的染色剂；机械、生物、化学药剂方法处理克服矮牵牛自交不亲和性的效果；适合矮牵牛茎尖组培的初代、继代和生根培养基以及花药、小孢子及未授粉子房培养体系的研究。利用单因子试验比较了液体培养基中蔗糖及硼、钙、镁、钾对矮牵牛花粉萌发的影响，在此基础上进行了L。(56)的正交试验。试验结果表明，适于矮牵牛花粉萌发的蔗糖浓度为1509／Lz硼对促进花粉萌发的作用很大，适宜的浓度为20mg／L，钙的作用次之；在蔗糖浓度为1509／L 的条件下，硼与钙存在明显的交互作用，各因素对花粉萌发率影响从大到 mg／L。快速测定花粉萌发的培养液为蔗糖1509／L+H。B0320mg／L+CaCI生命力的染色法为过氧化物酶
3、百合单倍体培养及细胞学观察
以野生种和4个杂种系共7份百合为试材,研究了基因型、培养基、预处理等关键性因素对百合雌、雄配子发育的影响。并在培养前期及整个过程中对细胞发育及胚胎形成进行了较为细致的细胞学观察,对百合雌配子离体培养过程中的胚胎发生及不同倍性植株的来源进行了研究与探讨。主要研究结果如下: 1.对影响百合游离小孢子活力及发育的因素进行了探讨,结果表明:百合雄配子体在单核期维持时间较短且处于单核期的花蕾长度因基因型而异。处于单核期的花药颜色均为浅黄色,花粉颜色为淡黄色,可作为采样适宜期表型指标;百合游离小孢子培养的适宜培养基为FHG培养基;小孢子的发育及活力与基因型及不同基因型花粉母细胞减数分裂的异常率紧密相关,花粉母细胞减数分裂异常率低的岷江百合
4、大白菜游离小孢子培养与单倍体育种技术应用
为建立高效的大白菜游离小孢子培养体系，以引自国内外的16个大白菜杂交种为试材进行游离小孢子培养，分析不同培养基和培养条件对胚状体发生、发育和植株再生的影响，探索小孢子植株倍性鉴定方法，并对获得的DH群体的园艺学特性进行了鉴定。选取部分DH群体配制杂交组合，调查各F<,1>代群体的植物学性状和经济性状，测定了产量配合力。主要研究结果如下。基因型是影响小孢子胚诱导的关键因素，不同试材的小孢子胚发生频率有明显差异，在16个品种中有14个诱导得到了胚状体，最高出胚率达10.16胚·蕾<-1>。2．培养基中添加0
5、枣花药再生植株及单倍体的获得
通过花药培养再生单倍体植株,然后经加倍获得纯合二倍体是果树染色体倍性创新的重要途经。本文系统研究了影响枣树花药植株再生的因素,建立了枣树花药植株再生优化体系,并获得了单倍体植株。主要结果如下:1.枣花药离体培养外植体的选择 适宜离体培养的花药其小孢子处于单核靠边期,因品种不同该时期相应的花蕾外部形态有所差异,但一般为绿色到黄绿色。2.枣花药愈伤组织的诱导 基因型、基本培养基、碳源、植物生长调节剂、光照条件等显著影响枣花药愈伤组织的发生。枣花药培养诱导愈伤组织的适宜培养基为1/2MS+1.0mg/L 2,4-D+3.5g/L琼脂+20g/L麦芽糖。在赞皇大枣、冬枣、辣椒枣、阜平大枣和月光枣5个枣品种中,冬枣花药出愈率最高、达到70.26%,阜平大枣最低、仅
6、黄瓜雌核发育途径诱导单倍体及其再生植株
从通过辐射花粉授粉诱导单倍体、对未授粉子房片进行培养诱导单倍体、以及通过远缘花粉授粉诱导单倍体的发生。尝试获得一个能够提高单倍体发生频率的方法获得单倍体植株。具体试验结果如下：1.辐射花粉授粉诱导单倍体的研究通过辐射花粉诱导单倍体对所获得小植株进行生根培养驯化移栽,取根系进行染’色体制片倍性鉴定,鉴定发现获得的35株再生植株均为单倍体植株。驯化过程中发现,单倍体植株驯化易形成雌花丛,这个现象在转基因黄瓜移栽中同样发生,增加了移栽难度。基因型对单倍体诱导率影响较大,10个不同的基因型中只有4个基因型能培养出单倍体再生植株。单倍体诱导率最高的是宁佳7号,但在后期驯化过程中大多发生雌花丛生,不能正常生长,而12552、12553则表现
7、烤烟单倍体诱导研究
烤烟是重要的经济作物。通过传统杂交育种方法得到具备双亲优良性状、遗传稳定烤烟品种需要多个世代,而通过诱导单倍体再加倍则能快速缩短育种时间。本研究以3个烤烟杂种一代品种为试材,以未授粉子房培养和与野生烟草N. africana杂交2种途径诱导烤烟单倍体,研究结果如下：1.子房发育时期对胚状体诱导影响大,发育时期越早越有利于培养。Coker371Goldx龙江911在花冠即将露出花萼时期胚状体诱导率最高,达到92.86%；对不同消毒方法效果的研究表明,不剥开花瓣,将花放入0.1%升汞浸泡8min效果最好,没有污染,胚状体诱导率为90%；剥开子房壁后环切子房是最好的接种方式,这种方式下胚状体诱导率达到90%；对接种密度的研究表明,1个三角瓶中接种2个子房诱导效果最好,胚状体诱导
8、苦瓜单倍体诱导的初步研究
以两种不同基因型的苦瓜品种Z-1-4×132-3-1、“翠妃”为实验材料,分析了花粉蒙导、化学药剂处理和未授粉子房离体培养等方法,对苦瓜单倍体诱导的影响,初步获得了如下结果：(1)用外源花粉对苦瓜子房进行蒙导法处理时,普通丝瓜(Luffa cylindrica roem.)的花粉刺激苦瓜子房生长的效果,要显著地优于黄瓜、冬瓜、南瓜、网纹甜瓜、瓠瓜等葫芦科作物。(2)用化学药剂处理苦瓜花粉时,80-100 mg/L的甲苯胺蓝溶液能显著地抑制苦瓜花粉正常萌发,导致花粉管异常,有利于刺激苦瓜子房进一步发育。1%-2%二甲基亚砜溶液能刺激30%的苦瓜子房进一步生长,但难以形成商品瓜。(3)比较了不同方法对苦瓜子房外植体的灭菌效果,结果表明用3%次氯酸钠溶液灭菌10 min的效果最好。此外,秋季
9、玉米单倍体育种及苗期耐渍性研究
以Stock 6的系列诱导系为材料，进行了单倍体育种的部分试验，旨在寻找单倍体最好的加倍方法和加倍浓度、调查单倍体的加倍频率和选择的准确率等，为单倍体在育种中的利用及高频诱导系的选育提供指导。 涝渍是热带、亚热带地区玉米主要的逆境胁迫之一，也是我国南方地区影响玉米最终产量的主要逆境因子之一。本研究对玉米苗期耐渍材料筛选、鉴定的指标及淹水处理敏感时期、淹水最佳持续时间等进行了研究，并利用筛选得到的耐渍自交系HZ32和敏感自交系K12制备F_2群体，对苗期耐渍QTL进行定位。取得了以下主要结果：1、通过2003和2004年两年的试验结果发现，母本基因型对单倍体诱导频率有显著影响，环境对单倍体诱导频率影响不大。单倍体鉴定的准确率不高，平均
10、马铃薯单倍体诱导培养
单倍体育种作为一种高效的育种方法,在马铃薯育种中已越来越受到关注。马铃薯单倍体产生的各种途径中,花药培养是目前获得单倍体最有效、应用最广泛的方法。但由于影响花药培养的因素很多,如材料基因型、接种时期、培养方式、培养基成分、预处理条件、培养条件等等,限制了该项技术的进一步应用。因此马铃薯花药培养技术体系仍是制约马铃薯单倍体育种的主要因素。本试验对20个基因型的马铃薯花药进行培养,分析消毒时间、基因型、预处理条件,尤其是诱导培养基和分化培养基的成分对提高马铃薯单倍体植株再生频率的影响。得到以下主要结论: 1.综合消毒效果和花药受损情况,认为最佳的消毒方法为:用70%酒精表面消毒30s后,用0.1%HGCl_2+1-2滴吐温-80消毒8min。2.马铃薯花蕾的颜色和
11、马铃薯花药培养及双单倍体植株的鉴定
12、苹果单倍体育种技术探究
13、茄子花药培养诱导单倍体植株的研究
14、甜瓜花药离体培养研究
15、甜瓜离体雌核发育诱导单倍体研究
16、玉米单倍体高频诱导系的筛选与加倍技术的研究
17、玉米单倍体诱导及加倍影响因素的研究
18、玉米单倍体诱导影响因素及加倍方法的研究
19、芦笋花药培养技术研究
20、甘蓝型油菜小孢子培养技术体系研究
21、008148791A 将二倍体转变成单倍体用于遗传诊断 1-28
22、008152837A 单倍体基因组用于遗传诊断、修饰和增殖 1-28
23、02158575XB 一种花药或花粉培养获得单倍体植株的方法 1-7
24、031290787B 一种使小繁缕在培养瓶内结籽的方法 1-11
25、038198878B 对兰类未受粉花进行生长素处理的兰类单倍体制成方法及兰类的培养方法 1-10
26、98120662XB 提高小麦花药培养的绿苗分化比率的方法 1-6
27、2004100043111B 获得西葫芦胚珠双单倍体植株的方法及其专用培养基 1-9
28、2004100044595B 获得甜瓜胚囊植株的方法及其专用培养基 1-11
29、2004100047625A 诱导小麦杂种产生纯合二倍体植株的育种材料和方法 1-8
30、2004100606107B 红菜薹单倍体培养的方法 1-13
31、2004100606111B 小白菜单倍体育种的方法 1-13
32、2004100867018B 一种辣椒游离小孢子细胞团培养方法 1-14
33、2004800312173B 使用单倍体交配策略在酵母中合成异聚多亚基多肽的方法 1-19
34、200510014670XB 一种诱导黄瓜大孢子离体单倍体胚胎发生的培养基及应用 1-10
35、200510022486XB 制备植物单倍体胚和单倍体植株的方法 1-12
36、2006100729214A 富铬、优质黑小麦特异种质培育方法 1-7
37、2006800175103A 产生单倍体和双单倍体植物胚的方法 1-21
38、200710048217XB 一种产生未减数配子的小麦基因型的简便筛选方法 1-10
39、2007100640489B 一种菊花单倍体育种方法 1-10
40、2007101207432A 茄子游离小孢子愈伤组织诱导及植株再生方法 1-11
41、2007101783704B 一种利用高油型诱导系诱导玉米单倍体和多胚体的方法 1-10
42、2008100220985B 黄瓜游离小孢子的培养方法 1-9
43、2008100647872A 一种预示和鉴定鸡体重和跖骨性状的单倍体型标记方法 1-23
44、2008101238952B 一种获得萝卜单倍体的育种方法 1-8
45、2008102235294B 鉴别玉米孤雌生殖单倍体的方法 1-16
46、2008102270141B 诱导茄子小孢子形成胚状体的方法及其专用培养基 1-14
47、2008800091107A 单倍体油棕和双单倍体油棕的生产方法 1-115
48、2009100698027A 利用胡萝卜游离小孢子培养单倍体再生植株的技术方法 1-5
49、2009100717780B 亚麻单倍体细胞悬浮系培养基 1-4
50、2009100956226B 雪菜单倍体育种方法 1-6
51、2009101753939B 一种提高辣(甜)椒游离小孢子培养胚状体诱导率的方法 1-9
52、2009102006073B 一种改良麦类作物耐低氮性状的方法 1-13
53、2009102062942A 定向生物技术 1-5
54、201010018236XB 一种结球甘蓝游离小孢子培养获得再生植株的方法 1-10
55、2010101196891A 菜心单倍体育种的方法 1-10
56、2010101375849B 一种高效诱导结球甘蓝双单倍体的方法 1-12
57、2010101397320B 玉米单倍体胚芽鞘节组织培养的方法及其专用培养基 1-13
58、2010101578491B 一种高产优质北五味子杂交纯合系的快速繁育方法 1-6
59、2010101781842B 西瓜单倍体的生产方法及其专用培养基 1-14
60、2010101978460B 凤尾兰花药组织培养的方法及专用培养基 1-8
61、2010101979482B 一种通过游离小孢子培养获得鸭茅单倍体植株的方法 1-15
62、2010102376463B 玉米种子单倍体分拣系统 1-6
63、2010102920541B 一种快速获得杂种小麦纯系的方法 1-14
64、2010105083708B 一种获得甜辣椒双单倍体植株的方法 1-10
65、2010105128075B 使用单倍体交配策略在酵母中合成异聚多亚基多肽的方法 1-25
66、2010106055527A 单倍体大豆 1-4
67、2010106078389B 一种获得栽培菊花单倍体的方法 1-8
68、2010800315105B 产生双单倍体植物的方法 1-7
69、2011100030291A 一种简便快速鉴别甘蓝型油菜小孢子再生的单倍体的方法 1-13
70、2011100595314A 一种玉米单倍体加倍管理方法 1-11
71、2011100979390B 一种油菜多目标性状的快速聚合育种方法 1-7
72、2011101417278A 玉米育种方法 1-5
73、2011102899422A 玉米孤雌生殖诱导系的选育方法和在选育玉米自交系中的应用 1-8
74、2011103251332B 利用除草剂加倍玉米单倍体的方法及其专用除草剂 1-11
75、2011103321674B 一种辅助鉴别玉米单倍体诱导系的方法 1-11
76、201110332342XB 一种辅助鉴定玉米单倍体诱导系的方法及其专用引物 1-10
77、2011103323896B 一种诱导玉米单倍体的方法 1-8
78、2011103670340B 一种小麦×玉米远缘杂交生产小麦双单倍体的方法 1-12
79、2011104308060A 获得青蒿单倍体植株的方法 1-8
80、2011104403370B 一种杨树单倍体培育方法 1-13
81、2012101469205A 一种玉米单倍体加倍方法 1-8
82、2012101890302A 一种快速鉴定啤酒酵母单倍体的方法 1-7
83、2012102030835B 一种红豆杉成熟胚乳诱导单倍体胚乳愈伤组织的方法 1-7
84、2012102936125B 小麦未减数配子基因的分子标记及其应用 1-9
85、2012104177001A 一种用于马铃薯双单倍体茎段离体诱导再生植株的培养基 1-20
86、2012104481463B 以单倍体玉米茎尖为受体的转基因育种方法 1-10
87、2012104794171B 诱导OT型百合花药获得（双）单倍体植株的方法及其培养基 1-13
88、2012105715054A 一种化学加倍玉米单倍体幼胚的处理方法 1-7
89、201280065785XA 单倍体细胞 1-77
90、2013100106641B 一种洋桔梗小孢子诱导获得单倍体植株的方法 1-8
91、2013100729445B 利用杂交诱导单倍体选育玉米自交系的方法 1-7
92、2013101032363B 孤雄单倍体干细胞系及其制法和应用 1-22
93、2013101515994A 一种工业黄酒酵母单倍体的分离方法 1-16
94、2013101533969A 一种广适性耐抽苔春白菜游离小孢子的培养方法 1-10
95、2013102170500B 一种芦笋小孢子诱导获得胚状体的培养方法 1-6
96、201310302454XB 一种利用玉米单倍体育种进行一步成系的方法 1-8
97、2013103143712B 诱导玉米单倍体的方法 1-27
98、2013103145135A 培育玉米单倍体诱导率高于玉米单倍体诱导系CAU5的玉米单倍体诱导系的方法 1-29
99、2013103471632B 五位一体品种选育方法 1-9
100、2013103504744A 一种结球甘蓝的单倍体植株培养方法 1-8
101、2013103552663B 一种诱导博落回花药离体单倍体胚胎发生及植株再生的方法 1-7
102、2013103796564B 一种抗寒棕榈的培育方法 1-8
103、2013104514226B 一种利用中美水稻远缘杂交和花药培养技术的聚合育种法 1-5
104、2013104593571B 一种诱导茄子花药再生单倍体植株的方法 1-12
105、2013104971880B 一种玉米单倍体植株染色体组加倍的方法 1-5
106、2013105552992A 一种单倍体育种方法种植党参的技术 1-3
107、2013105929062A 冷休克诱导大鳞副泥鳅雄核发育单倍体的方法 1-6
108、2013106800148B 通过未受精胚珠培养雄性不育烟草单倍体的方法 1-13
109、2013107172771B DNA甲基化抑制剂在提高玉米父本单倍体诱导系诱导效率中的应用 1-12
110、2014100003090B 一种小麦玉米杂交诱导单倍体胚的麦穗离体培养液配方及制备方法 1-7
111、2014100115240B 一种甘蓝小孢子单倍体植株加倍的方法 1-10
112、2014100131421B 一种籼粳杂交水稻花药培养方法 1-10
113、2014100410203A 红王子锦带单倍体植株再生的方法 1-16
114、2014100913306A 一种黔西北玉米不同种质单倍体诱导及二倍化方法 1-5
115、2014102093509A 一种铁皮石斛的单倍体育种方法 1-9
116、2014102495403B 一种玉米单倍体诱导方法 1-10
117、2014102740706B 一种辣椒花药培养获得单倍体再生植株的方法 1-6
118、2014102744444B 一种茄子花药培养获得单倍体再生植株的方法 1-6
119、2014102777842A 玉米单倍体植株的培育方法 1-17
120、201410290716XA 一种甜玉米单倍体化学浸种加倍方法 1-21
121、2014103136323B 一种茄子花药培养诱导单倍体植株的培养基及其方法 1-12
122、2014103147794A 一种小麦玉米杂交诱导单倍体胚的麦穗离体培养方法 1-7
123、2014103626854A 一种高效鉴别玉米孤雌生殖单倍体的方法 1-5
124、2014103631513B 一种获得红掌单倍体植株的方法 1-7
125、2014103713265B 一种快速获得紫花菜单倍体植株的方法 1-7
126、2014106446020A 一种通过花药培养获得制干辣椒单倍体植株的方法及培养基 1-6
127、2014106553060B 一种培养结球甘蓝游离小孢子高效获得再生植株的方法 1-9
128、201410710796XA 一种禾谷类作物单倍体群体的构建方法 1-12
129、2014107838429A 一步法诱导百合花药获得DH植株的培养方法 1-13
130、2014108129650A 一种一步法诱导烟草单倍体植株的方法 1-7
131、2014108192512B 一种聚合双抗普通花叶病和黑胫病种质资源的选育方法 1-11
132、2015100804746A 一种通过未受精胚珠培养诱导雌核发育获得黄瓜再生植株的方法 1-16
133、2015100859289A 一种白芷花药离体培养技术 1-5
134、201510138422XA 快速获得大量小麦双单倍体纯合群体的方法 1-9
135、2015102783316A 一种玉米单倍体诱导系的选育方法及其专用引物 1-10
136、2015102795597A 一种利用玉米单倍体诱导培育核质互作雄性不育系的方法 1-10
137、2015102897054A 一种鉴别玉米单倍体的方法 1-12
138、2015103591987A 使用单倍体干细胞高效建立遗传修饰动物模型的方法 1-46
139、2015104714325A 一种牙鲆雄核发育双单倍体的诱导及检测方法 1-16
140、2015105036644A 一种玉米单倍体染色体组加倍的方法 1-6
141、2015105054924A 一种玉米单倍体幼胚加倍的方法 1-8
142、2015105054958A 一种鉴别玉米单倍体幼胚的方法及其应用 1-11
143、2015106312603A 一种制备蜀葵单倍体细胞的方法 1-6
144、2015108597674A 鲜食玉米杂优群逐步分类种质改良与育种技术体系 1-6
145、2015108599523A 多生态广适应多抗性暨育种潜力递增的群体改良育种系统 1-7
146、2015108824663A 一种小麦单倍体试管植株染色体加倍的方法 1-10
147、2015109175190A 一种基于玉米幼胚的形态鉴别单倍体的方法 1-10
148、2015109753311A 一种人皮肤干细胞体外分化单倍体生殖细胞的方法 1-10
149、2016100437722A 一种小麦与玉米杂交诱导单倍体胚的花期相遇调节方法 1-10
150、2016100580415A 一种快速稳定分离鉴定菰黑粉菌性亲和单倍体菌株的方法 1-26
151、2016100580434A 一种菰黑粉菌单倍体菌株UET2及其应用 1-16
152、2016100580449A 一种菰黑粉菌单倍体菌株UET1及其应用 1-17
153、2016100580472A 一种菰黑粉菌单倍体菌株UEMT3及其应用 1-16
154、2016100580491A 一种菰黑粉菌单倍体菌株UEMT2及其应用 1-16
155、201610065016XA 玉米单倍体加倍药液快速定量注射器 1-7
156、2016100761726A 一种通过离体培养白桦花药获得单倍体再生植株的方法 1-7
157、2016101052229A 一种玉米单倍体育种中大规模诱导花粉源的产生方法 1-8
158、2016101245950A 一种提高玉米单倍体诱导育种诱导率的方法 1-5
159、201610172055XA 一种提高牙鲆有丝分裂雌核发育双单倍体诱导效率的方法 1-28
160、2016102248212A 一种双单倍体及化学诱导联合作用的芥菜型油菜育种方法 1-10
161、2016102804800A 利用轮选修复提高玉米单倍体雄花自然加倍率的育种方法 1-9
162、2016103271432A 控制玉米单倍体自然加倍QTL连锁的分子标记及其应用 1-11
163、2016103277157A 一种植物单倍体加倍方法 1-6
164、2016105569817A 与辣椒花药黄色基因紧密连锁的分子标记GSSR114及其应用 1-18
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